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高效液相色譜分析柱的分離效果取決于所選擇的固定相，以及色譜分析柱的制備和操作條件。色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2...

高效液相色譜分析柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。柱結(jié)構(gòu)：一般色譜柱是由色譜柱管、末端接頭、卡套(又稱密封...

超高效液相色譜儀的實(shí)驗(yàn)原理：超高效液相色譜分離是利用試樣中各組分在色譜柱中的淋洗液和固定相間的分配系數(shù)不.同，當(dāng)試樣隨著流動相進(jìn)入色譜柱中后，組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次(10*-10°)的分配(吸附一脫附一放出)由于固定相對各種組分的吸附能力不同(即保存作用不同)，因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過一定的柱長后，便彼此分離，順序離開色譜柱進(jìn)入檢測器，產(chǎn)生的離子流信號經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。超高效液相色譜儀系統(tǒng)優(yōu)勢：1、高分離度：a、利用高效創(chuàng)新...

進(jìn)樣器是將樣品溶液準(zhǔn)確送入色譜柱的裝置，分手動和自動兩種方式。對于液相色譜而言，無論是手動進(jìn)樣器或是自動進(jìn)樣器都是用六通閥進(jìn)樣的，只是自動進(jìn)樣的較手動進(jìn)樣器的死體積較大，多了計(jì)量泵和一部分聯(lián)接管線。六通閥也稱進(jìn)樣閥，原理為電機(jī)帶動轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)子根據(jù)需要旋轉(zhuǎn)一定的角度與定子中的各種通路接通。進(jìn)樣周期由計(jì)時(shí)器控制，促動器給出信號轉(zhuǎn)動閥到進(jìn)樣位置，注射器將一定量的樣品取至定量環(huán)。一般來說,自動進(jìn)樣器包括進(jìn)樣臂、進(jìn)樣針、樣品盤、清洗系統(tǒng)、驅(qū)動系統(tǒng)以及控制系統(tǒng)等部分組成,各個(gè)部分之間緊密合...

超高效液相色譜儀借助于HPLC的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測手段等全新技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。該儀器不僅分析速度超快，分辨率更高，在單個(gè)系統(tǒng)上進(jìn)行常規(guī)以及更高壓的高效液相色譜分析，提高了靈敏度和靈活性。超高效液相色譜儀的使用優(yōu)勢：1、超級創(chuàng)新：a、為滿足色譜實(shí)驗(yàn)室對歷史追蹤不斷增長的需求，每根ACQUITYUPLC色譜柱出售時(shí)均帶一個(gè)終身性的eCord，它能記錄進(jìn)樣次數(shù)，的反壓和柱溫。2、超高分離度：a、利用高效創(chuàng)新小顆粒填料（1...

進(jìn)樣閥在進(jìn)樣過程中，必須是非常清潔的，否則得不到較好的結(jié)果。進(jìn)樣閥切換到進(jìn)樣位置（Inject）后，要在此位置保持一段時(shí)間，使流動相充分沖洗樣品定量管，這樣可以保證有較高的度，而且不用另外再沖洗樣品定量管。這種由色譜儀器控制的沖洗顯然要比手動沖洗更好些。注意：沖洗需要的流動相體積至少為所進(jìn)樣品體積的10倍。當(dāng)樣品定量管經(jīng)過充分的沖洗后，可以將旋柄轉(zhuǎn)回取樣位置（Load），也可以繼續(xù)保持在進(jìn)樣位置，到下次取樣前才切換回取樣位置。在切換回取樣位置時(shí)，將樣品進(jìn)樣針或微量樣品進(jìn)樣針從...

高效液相色譜是目前應(yīng)用較多的色譜分析方法，高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體，為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。和其它分析儀器一樣，你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù)，首先你要保養(yǎng)好它，使它處于一個(gè)良好的待機(jī)狀態(tài)，這樣你操作它...

c18色譜柱的柱填料的物理性能對填料色譜行為有重要影響。填料主要的物理性能包括如下：顆粒度、孔徑、孔體積、鍵合相化學(xué)、含碳量及烷基化處理。1、化學(xué)鍵合相填料在高效液相色譜法中占有極重要的地位。它可以鍵合極性較大的有機(jī)基團(tuán)，采用極性較小的溶劑作流動相。亦可鍵合極性較小的有機(jī)基團(tuán)，選用極性較大的溶劑作流動相。c18色譜柱是以硅烷化鍵合型(Si-O-Si-C)存在的，這類鍵合反應(yīng)目前應(yīng)用Zui為普遍。2、顆粒度是指柱填料的顆粒直徑的大小。實(shí)際上色譜柱上所標(biāo)的粒徑是一個(gè)平均值。如粒徑...